今天我们来聊聊体细胞杂交,以下6个关于体细胞杂交的观点希望能帮助到您找到想要的大学知识。
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体细胞杂交面临哪些问题?
自从得到首例烟草体细胞杂种以来,体细胞杂交技术已经有很长的历史,也在许多植物上得到了种间、属间,甚至科间体细胞杂种。
但是,体细胞杂交在蔬菜育种方面取得的突破性成果并不多,它面临的主要问题是:①植株再生的难易会直接影响体细胞杂交育种的成败。如豆科和葫芦科植物,植株再生困难,随机性大。因此,原生质体再生困难直接阻碍了体细胞杂交在这些作物上的应用。
②体细胞杂种或胞质杂种本身染色体数目不定、染色体结构发生变异及异常的减数分裂等都会造成培养过程中表现不稳定。不是通过受精作用组合双亲的遗传物质,而是在物理、化学因素诱导下使双亲的体细胞融合。所以在杂种细胞内很容易产生染色体或基因排斥,减数分裂时联会错乱等异常现象,从而导致基因的拷贝数不定。除此之外,所得的体细胞杂种一般是双亲基因组的随机组合,即使是对称体细胞杂交,也极少得到具有两个亲本完整基因组的杂种。上述因素已经成为体细胞杂交育种面临的主要障碍。因此,提高体细胞杂种的遗传稳定性将成为体细胞杂交育种取得突破性进展的关键。
③用射线照射(紫外线、X射线、γ射线等)非对称杂交的供体亲本,从悬浮培养细胞中提取原生质体,或通过芽再生途径获得植株等都会加重杂种染色体的丢失,而且染色体丢失是一个非常复杂的过程,还受双亲的遗传关系、倍性水平等因素影响。由于体细胞非对称杂交具有一些独特优点,其应用受到重视。但目前还不能严格控制用射线等因素打断供体染色体的程度,向受体转移特定基因还具有很强的随机性。因此,进一步优化处理供体原生质体的措施,降低转移供体基因的随机性显得尤其重要。
④体细胞杂交育种同样面临着杂种不育或育性差的问题。利用体细胞杂交技术已经得到许多植物的体细胞杂种,然而一些植物的属间体细胞杂种存在着不育或育性低的问题。这一问题很可能是由上述的遗传不稳定性造成的。因此研究体细胞杂种的遗传基础乃是重中之重。面对以上实际问题,将细胞工程与分子生物学手段相结合,降低杂种基因来源的随机性,采取对杂种进行早期鉴定的措施,能够促进体细胞杂交在园艺作物育种中取得突破性进展。
除此之外,体细胞杂交时选用不同基因型的个体作亲本得到正常植株的希望比较大;延长再生过程能够增加重组率;采用不同的培养方法和诱导植株再生的方法能在一定程度上避免遗传信息丢失。非对称杂交获得的杂种含供体亲本染色体片段的频率比较高,而对称杂交会使杂种含有较多完整双亲染色体。所以在体细胞杂交前多选择几个基因型的植株作亲本,慎重选择对称杂交还是非对称杂交,选择合适的融合产物培养方法,以及选择出最好的再生植株加以研究利用都很重要。总之,体细胞杂交在创造园艺作物新种质,转育园艺作物优良性状,提高园艺作物的抗性,改变园艺作物生理类型等方面都有独特的优点。但是,体细胞杂交也是一项非常精细繁琐的工作,各方面都要考虑周全。作为传统育种的辅助手段,体细胞杂交常常与花药培养、回交等育种方法相结合,才能发挥其优势,完成新品种的选育,推进园艺作物育种工作的发展。
目前原生质体融合的发展趋势是:原生质体融合由以模式植物为主转移到以经济作物和重要粮食作物为主;融合方式由先前的对称融合为主逐渐变为对称、非对称融合同时发展;融合技术不断改进,从早期的NaNOsubscript3subscript诱导融合,逐步发展到以PEG诱导融合为主,现在采用电场诱导融合的研究不断增多;融合由追求新异转变为近年朝着育种和优异种质创造方向发展;开展融合的材料已涉及到很多植物,既有粮食作物,也有经济作物。
植物体细胞杂交的过程是怎样的
体细胞杂交是克服植物有性杂交不亲和性、打破物种之间的生殖隔离、扩大遗传重组范围的一种手段。操作过程包括: 原生质体制备、原生质体融合、杂种细胞筛选、杂种细胞培养、杂种植株再生以及杂种植株鉴定等步骤。 原生质体制备是用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁分解掉,只留下细胞膜(质膜)包裹着细胞内含物。原生质体融合是指两个原生质体的质膜重新组合排列形成一个质膜,其中含有两个细胞核。在细胞工程中一般是诱导融合,形成的融合细胞中所含有的两个细胞核是来自不同的物种,称之为异核体(heterokaryon)。诱导融合的手段有化学诱导和物理诱导。在诱导因素的作用下形成的融合细胞进一步产生核融合,进行第一次有丝分裂。 杂种细胞的筛选方法有: ①细胞系互补的选择方法,包括叶绿素缺失互补、营养缺陷互补和抗性互补等; ②利用物理特异性差异的选择方法:这是利用两个原生质体物理特异性差异的一种选择,包括原生质体的大小、颜色、浮密度等的不同来选择; ③利用生长特异性差异的选择方法。需要注意的是上述选择方法只适合部分杂交细胞的情况,有时无法选择,就不加选择地进行培养和再生成植株,然后对再生植株的杂种性状进行鉴定。 杂种细胞培养方法与原生质体的培养方法相似。 体细胞杂种的鉴定方法有: ①形态学鉴定。利用杂种植株与双亲在表现型上的差异进行比较分析,如叶片大小与形状,花的形状与颜色、叶脉、叶柄、花梗及表皮毛有无等; ②细胞学鉴定。杂种植株细胞中的染色体数目是否比任何一方亲本细胞中的染色体数目增多?理论上讲如果染色体不丢失,杂种细胞中染色体数目应为双亲染色体数目之和。也可以用基因组原位杂交的分子细胞学方法进行鉴定; ③同功酶鉴定。同功酶是功能相同的酶的多重分子形态,它们是特异基因的产物。杂种细胞中的同功酶谱一般是双亲酶谱之和,但有时也会出现双亲没有的新带; ④分子生物学鉴定。常用的方法有限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性(RAPD)和扩增片段长度多态性(AFLP)等。 值得注意的是体细胞杂交尚存在一些问题: ①亲缘关系越远,染色体排斥丢失的现象就越严重; ②由于是两个物种的全部遗传物质的合并,各种基因都在其中,选择符合需要的个体难度大; ③有时缺乏选择杂种细胞的有效方法。因此目前整体对称融合的工作比较少,而是采用非对称融合,即一方亲本包括了全部遗传物质,另一方亲本只取一部分遗传物质,如用不具有核的原生质体与之进行融合。
植物体细胞杂交的过程和优点
过程:将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理,得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B,运用物理方法或是化学方法诱导融合,形成杂种细胞,再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。优点:克服远缘杂交不亲和的障碍,扩大杂交亲本范围,培育新优良品种。 扩展资料 植物体细胞杂交的'过程:将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理,得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B,运用物理方法或是化学方法诱导融合,形成杂种细胞,再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。体细胞杂种后代在遗传上常常不稳定,这可能涉及到多方面的因素,如亲缘关系的远近、培养过程中的染色体变异、细胞核、细胞质遗传物质的重组等。优点:克服远缘杂交不亲和的障碍,扩大杂交亲本范围,培育新优良品种。举例:“白菜-甘蓝”同白菜相比,具有生长期短,耐热性强,和易储藏等优点。
体细胞杂交的概念及具体环节
基因型不同的体细胞之间的融合就是体细胞杂交,又称体细胞融合,简单来说就是将两个细胞核融合,常见的体细胞杂交就是原生质体培养,在较高渗透压的甘露醇溶液环境下用纤维素酶和果胶酶混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞,将细胞壁消化除去,获得球形的原生质体。然后通过物理法的离心、振动、电刺激等或化学法的聚乙二醇(PEG)使原生质体A与原生质体B融合,等其再生出细胞壁形成杂种细胞,整个过程就结束了。体细胞杂交还包括杂交瘤技术制备单克隆抗体等
体细胞的杂交有哪些意义?
原生质体融合(protoplast:fusion),也叫体细胞杂交(somatic:hybridization),是指不同种类的原生质体不经过有性阶段,在一定条件下融合创造杂种的过程。为了与有性杂交区别开来,原生质体融合常常写作“a(+)b”,其中a和b是两个融合亲本,(+)表示体细胞杂交。
体细胞杂交的简介
体细胞是生物体除生殖细胞外的所有细胞。将从身体分离的体细胞做组织培养进行遗传学研究的学科称为体细胞遗传学(somaticgenetics)。体外培养细胞可人为控制或改变环境条件,并可建立细胞株,长期保存,进行各种正常和病理研究。与基因定位有关的是体细胞杂交(somaticcellhybridization)。细胞杂交又称细胞融合(cellfusion),是将来源不同的两种细胞融合成一个新细胞。大多数体细胞杂交是用人的细胞与小鼠、大鼠或仓鼠的体细胞(hybridcell)进行杂交。
细胞融合后,要进行异核体的筛选。所用方法是:①根据双亲细胞的形态特征,用不同荧光染料标记,人工挑选或用荧光激活细胞分拣机分离。或通过显微操作直接挑选。②在合适的选择压下,只允许杂种细胞生长,淘汰双亲和同源融合细胞。如生长激素自主选择、代谢互补选择、白化互补选择、营养缺陷型互补选择、药物抗性互补选择等。
融合后的杂种细胞的异核体,多数情况下在第一次有丝分裂期即发生两个亲本核的融合,如果两个核在杂种细胞中位置较近,也可能在有丝分裂前就发生融合。如果两个核不融合,有可能发育成嵌合体。如果两核既相互辅助又相互排斥,从而导致染色体丢失,经常还会伴随着染色体重排、染色体碎片、染色体环、染色体桥等形成。融合后的两个原生
质体的细胞质,可能均匀混合,细胞器也均匀分布,因此双方的叶绿体及线粒体基因都得到遗传。也有人认为在两个原生质体融合时,质体会随机丢失。融合后的细胞是否为杂种,多用染色体形态比较法和同工酶分析法来鉴定,也有用花器官的形态颜色来检测的。
一般来说,植物有性杂交只能在同种或在系统分类上相近种的亲本间进行,核性状按孟德尔遗传规律分离,而核外基因则大多数为母性遗传。体细胞杂交能克服有性杂交的配子不亲合性,获得一些含有另一亲本非整倍体的杂种或胞质杂种。它们的遗传变异范围极广,大大丰富了育种的原始材料,从而创造出自然界中没有的新物种。如马铃薯与番茄融合得到的薯番茄和番茄薯。没有壁的裸露细胞,有利遗传操作,转移部分基因或基因组,已成功的如胡萝卜一S欧芹融合。因此体细胞杂交在物种改良上有着广阔前景。另外甘蓝与白菜融合,人工合成的甘蓝型欧洲油菜,在实验室中短时间内重复出现了自然界的进化过程,使芸苔属的三角进化关系又一次得到验证。体细胞杂交技术也为细胞生物学研究及遗传学分析提供了一个新的研究途径。
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